北京基因组所研发RNA甲基化7-甲基鸟嘌呤（m7G）测序技术
7-甲基鸟嘌呤（m7G）修饰是转录后调控中最常见的碱基修饰形式之一，广泛漫衍于tRNA、rRNA、以及真核生物mRNA的5’帽子区，对维持RNA的加工代谢、稳定、出核以及卵白质翻译具有重要作用。近期研究标明高等真核生物mRNA内部也含有m7G修饰，然而对其漫衍特征和调控作用目前尚不清楚。
pg电子官网杨运桂团队开发了单碱基区分率的m7G高通量测序技术(m7G miCLIP-seq)，通过该要领系统性描绘m7G在真核生物mRNA内部的漫衍特征，并进一步解析应激处理下该修饰对卵白质翻译的分子调控机制。相关研究结果在9月13日以Dynamic methylome of internal mRNA N7-methylguanosine and its regulatory role in translation为题在线宣布于Cell Research杂志。
研究团队通过绘制真核生物mRNA内部的m7G漫衍图谱，发明该修饰的漫衍具有物种守旧性。正常条件下，人和小鼠mRNA内部的m7G显著富集于5’非翻译区（5’UTR）尤其是翻译起始位点四周的AG二碱基富集区；而H2O2和热激处理下，m7G漫衍爆发动态性变革，显著富集于基因编码区（CDS）和3’UTR区。结合Ribosome profiling数据发明，应激处理下形成的m7G具有增进卵白质翻译的作用；进一步结合minigene报告系统证实，H2O2处理下PCNA 3’UTR上的m7G修饰能够增强该基因的翻译效率。进一步通过western blot实验证实，应激处理下，已知的m7G甲基转移酶METTL1的卵白水平显著增加，说明应激处理下METTL1可能加入调控真核生物mRNA内部的m7G形成。
该研究通过开发单碱基区分率的m7G高通量测序技术，乐成绘制了高等真核生物mRNA内部的m7G动态漫衍图，并揭示了应激处理下m7G对卵白质翻译的分子调控机制，为后续m7G的功效性研究提供基本的技术和理论支撑。该研究获得了pg电子官网战略性先导科技专项、国家自然科学以及国家重点研发计划等基金资助。
mRNA内部m7G的高通量测序技术及对mRNA翻译调控机制
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